堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的驢抗羊IgG 如果一抗自己帶有可以被檢測(cè)出的標(biāo)記，則不需要二抗。但這樣成本很高，因?yàn)橐环N一抗只識(shí)別一種底物。所以如今的設(shè)計(jì)一般是二抗帶上可檢測(cè)標(biāo)記，再來(lái)檢測(cè)一抗。而一抗識(shí)別底物。這樣，當(dāng)一抗結(jié)合到底物上，就可以通過(guò)二抗檢測(cè)出來(lái)。預(yù)吸附處理可降低二抗與細(xì)胞和組織樣品中的內(nèi)源性免疫球蛋白發(fā)生交叉反應(yīng)的風(fēng)險(xiǎn)。

堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的羊抗兔IgG 二抗：可以和一抗結(jié)合，并帶有可以被檢測(cè)出的標(biāo)記，作用是檢測(cè)一抗。如果一抗來(lái)源于山羊，二抗必須選擇抗山羊的抗體。

堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的小鼠抗兔IgG 二抗：可以和一抗結(jié)合，并帶有可以被檢測(cè)出的標(biāo)記（如帶熒光、放射性、化學(xué)發(fā)光或顯色基團(tuán)），作用是檢測(cè)一抗。二抗必須能識(shí)別一抗。如果一抗是小鼠單克隆抗體，分離類(lèi)型是小鼠IgG1，那么二抗必須選擇抗小鼠IgG的抗體；

堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的驢抗兔IgG 二抗：可以和一抗結(jié)合，并帶有可以被檢測(cè)出的標(biāo)記，作用是檢測(cè)一抗。雖然可購(gòu)買(mǎi)能識(shí)別所有亞類(lèi)的一般的抗小鼠IgG二抗，但盡可能購(gòu)買(mǎi)抗某一特定亞類(lèi)的抗體以增加特異性。大多數(shù)物種的分離類(lèi)型都是IgG，物種特異性抗IgG抗體能很好地工作。但注意鳥(niǎo)類(lèi)或禽類(lèi)的免疫球蛋白為IgY。

堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的羊抗小鼠IgG 二抗：可以和一抗結(jié)合，并帶有可以被檢測(cè)出的標(biāo)記，作用是檢測(cè)一抗.小鼠IgG抗體還可以分為各種亞類(lèi)，如IgG1，IgG2a，IgG2b，IgG2c，IgG3。

堿性磷酸酶（AP）標(biāo)記的兔抗小鼠IgG 二抗：可以和一抗結(jié)合，并帶有可以被檢測(cè)出的標(biāo)記，作用是檢測(cè)一抗。購(gòu)買(mǎi)二抗時(shí)注意分別選擇抗小鼠IgM和小鼠IgG的抗體。